Comment préparer une solution tampon phosphate
La solution tampon phosphate (PBS) est une solution tampon couramment utilisée dans les laboratoires de biologie et largement utilisée dans la culture cellulaire, l'immunohistochimie, la biologie moléculaire et d'autres domaines. Cet article présentera en détail la méthode de préparation du tampon phosphate et joindra un tableau de données structurées pour référence aux lecteurs.
1. Le rôle du tampon phosphate
La fonction principale du tampon phosphate est de maintenir une valeur de pH stable de la solution et d'assurer la stabilité des conditions expérimentales. Son pH est généralement compris entre 7,2 et 7,4, ce qui est similaire à l'environnement physiologique et convient à la plupart des expériences biologiques.
2. Méthode de préparation de la solution tampon phosphate
La préparation du tampon phosphate nécessite les réactifs suivants :
| Réactifs | Dosage (1L) |
|---|---|
| Chlorure de sodium (NaCl) | 8,0g |
| Phosphate monopotassique (KH2PO4) | 0,24g |
| Hydrogénophosphate disodique (Na2HPO4) | 1,44g |
| Chlorure de potassium (KCl) | 0,2g |
Étapes de préparation :
1. Pesez les réactifs ci-dessus, ajoutez 800 ml d'eau distillée et remuez jusqu'à dissolution complète.
2. Utilisez de l'acide chlorhydrique ou de l'hydroxyde de sodium pour ajuster le pH entre 7,2 et 7,4.
3. Diluer à 1 L, stériliser à l'autoclave ou au filtre avant utilisation.
3. Précautions pour le tampon phosphate
1. Des réactifs de haute pureté doivent être utilisés pendant la préparation pour éviter que les impuretés n'affectent les résultats expérimentaux.
2. Lors du réglage du pH, travaillez lentement pour éviter un réglage excessif.
3. La solution tampon stérilisée doit être scellée et stockée pour éviter toute contamination.
4. Questions fréquemment posées sur le tampon phosphate
| question | Solution |
|---|---|
| La valeur du pH est instable | Vérifiez la pureté du réactif et préparez-le à nouveau |
| La solution est trouble | Filtrer ou re-stériliser |
| Mauvais effet tampon | Vérifiez le rapport des réactifs et ajustez la formule |
5. Résumé
La préparation du tampon phosphate est une opération de base dans les expériences biologiques. La maîtrise de la bonne méthode de préparation est cruciale pour la précision des résultats expérimentaux. Cet article fournit des recettes et des étapes détaillées, dans l’espoir d’aider les lecteurs.
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